Kilka podstawowych informacji.
Przede wszystkim należy zauważyć, że barwienie Golgiego należy do tak zwanych morfologicznych typów przebarwień w neuronauki, gdzie rzeczywista anatomia różnych neuronów (w porównaniu z innymi technikami, takimi jak obrazowanie Ca lub obrazowanie potencjalne).
Po drugie, barwienie Golgiego jest rodzajem barwienia srebra, w którym osadza się srebro lub jego sole (tutaj: chromian srebra) ujawnia morfologiczne cechy komórek.
I po trzecie, na utrwalony preparat stosuje się barwienie Golgiego. Oznacza to, że tkanka (zwykle wycinek mózgu) jest wstępnie traktowana (tutaj: formolem) w celu zabicia wszystkich komórek i zatrzymania każdego procesu biologicznego.
Co wiadomo o celach.
Powszechny opis celu jest cytowany jako „ograniczona liczba losowo wybranych komórek w całości”. To jest istota barwienia Golgiego:
-
Barwione są tylko pojedyncze komórki , dlatego nie ma przeszkód w barwieniu sąsiednich komórek podczas określania struktury morfologicznej komórki (bardzo ważne w mikroskopii świetlnej, w której zintegrowano dane wejściowe z różnych głębokości).
-
Komórki są wybarwione losowo , nie ma znanej preferencji wśród komórki neuronalne do barwienia Golgiego i nie widziałem żadnych innych typów komórek w OUN barwionych Golgim, dlatego jest dość specyficzny dla komórek neuronowych (i pozostawia nienaruszony makro- i mikroglej, astrocyty itp.) .
-
Komórki są wybarwione w całości , co oznacza, że cała komórka jest bardzo ładnie wybarwiona, pokazując szczegółową arborizację drzewa dendrytycznego, co było bardzo ważne w badaniu komórek Purkinjego w móżdżku.
Czy większe neurony są bardziej podatne na zabarwienie? Czy określone typy komórek są bardziej podatne niż inne?
Barwienie Golgiego jest używane głównie do wycinków mózgu (nigdy nie widziałem ani nie słyszałem jego zastosowania do innych tkanek). Tradycyjnie jedną z największych komórek są tutaj neurony piramidowe (NA, ACh-ergiczne), a jednymi z najmniejszych są interneurony (często GABA-ergiczne) - oba są podatne na barwienie Golgiego ( odniesienie) i tam nie ma pozornego skupiania zabarwionych komórek ze względu na ich rozmiar lub typ przekaźnika.
Co powstrzymuje nas przed zastosowaniem zaawansowanych technik biologii molekularnej do zrozumienia tego procesu?
Mogę wymienić kilka powodów takiego stanu rzeczy:
-
Ponieważ barwienie Golgiego jest stosowane do utrwalonego preparatu, tkanka jest już „uszkodzona” (formol prowadzi do wysuszenia komórek i szarpania), dlatego Trudno jest zastosować jakieś doskonałe metody biologii molekularnej do badania tych tkanek.
-
Nie ma sposobu, aby stwierdzić, które komórki zostały wcześniej wybarwione. Dopóki zaczyna się mikrokrystalizacja chromianu srebra, nie można jej (łatwo) zatrzymać i odwrócić. Dlatego trudno jest przyjrzeć się temu, co spowodowało późniejsze zabarwienie, a następnie cała komórka jest impregnowana srebrem.
-
Myślę, że nie było żadnych prawdziwych prób złamania tajemnicy tego zabarwienia : jakie to może być interesujące, wydaje się, że jest to interdyscyplinarne pytanie na pograniczu biologii i chemii. Więc może kiedyś ktoś się temu przyjrzy i wszystko wyjaśni.